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ELISA试剂盒:选对,用对,才能事半功倍.

ELISA试剂盒:选对,用对,才能事半功倍.

发布时间:2019-07-11

ELISA试剂盒的正确选购与运用尤为重要。尤为是关于新手而言,掌握ELISA试剂盒的选购与运用方面的知识更为重要。

一、ELISA试剂盒选购技巧

试剂盒的应用种属、检测样本的品种:除试剂盒特别说明外,一般不同种属不能通用。常见待测样本品种有:血清和血浆(不同抗凝剂),细胞上清,和细胞裂解液,试剂盒中不相同本的稀释液不混用;

试剂盒的检测规模:也就是标曲规模,特别要注意待测样本浓度是否落在标曲规模内,关于浓度很高的样本,能够先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。 

试剂盒中的稀释线性及回收率:

a、稀释线性一般指样本稀释线性,是将样本梯度稀释下来,看各稀释梯度浓度是否成线性;参阅样本稀释线性能够选择样本的较佳稀释倍数;

b、稀释线性也有做加标稀释线性的情况,加标稀释线性是将规范品参加样本中测定参加的规范品浓度测定是否准确;相同也是确定待测样本稀释倍数的参阅目标。一般线性和回收率的规模在80%-120%比较合适; 

试剂盒的其它目标:

a、灵敏度:试剂盒能够检测到的样本低浓度的才能,如果待检目标含量很低,需求选择高灵敏度的ELISA试剂盒

b、板间和板内的变异系数(CV%):反映板内和不同板之间是否均匀,CV%一般小于10% 比较好。

c、试剂盒的有效期:试剂盒的有效期一般是半年至一年,样本预备时间需求考虑到试剂盒的有效期。

二、ELISA试剂盒运用技巧

样本的预备:尽量运用新鲜样本,不运用有溶血,被细菌污染、标本保存时间过长和标本凝固不全的样本。ELISA检测宜采集新鲜标本,如不能立即测定,5天之内应4℃保存,关于1周后检测的样本应低温冻存;做好分装,长期冻存的样本防止反复冻融。

仔细阅读说明书,了解整个流程,引荐画出扼要步骤图;提早预备试剂,比方常见20X洗涤液是浓缩液,需求用超纯水提早稀释预备好。一般的检测抗体和酶标二抗需求用对应的稀释液稀释至工作浓度。
 


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